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腫瘤類器官簡述
引言 2009年,Hans Clevers和其實(shí)驗(yàn)室的博士后Toshiro Sato用來源于小鼠腸道的成體干細(xì)胞培育出首個(gè)微型腸道類器官,掀起了類器官研究的熱潮。2011年,Sato等運(yùn)用類器官技術(shù)率先建...
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分類:
類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-19
類器官培養(yǎng)常見問題解答
一、細(xì)胞準(zhǔn)備篇 1、 組織消化選擇什么消化液,消化多長時(shí)間? 答:組織的消化液有兩種,一種是 EDTA, 另一種是膠原酶,EDTA 適合消化空腔性器官,例如小腸和胃;膠原酶消化應(yīng)該比較廣泛,一般會(huì)搭配 DNA 酶...
[詳細(xì)]
分類:
類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
免疫熒光和流式方案
小腸、胃類器官的免疫熒光染色方法 1、吸去培養(yǎng)板孔內(nèi)的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗三次,棄去 PBS; 2、往基質(zhì)膠孔內(nèi)加入 4%多聚甲醛固定 15 min; 3、用 PBS 清洗三次,用亞甲基藍(lán)將基質(zhì)膠染色以便...
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分類:
類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
小鼠胃類器官的培養(yǎng)
胃類器官是一種衍生于胃干細(xì)胞或者多能誘導(dǎo)干細(xì)胞的類器官模型,體外培養(yǎng)的胃類器官含有多種細(xì)胞克隆亞群,其培養(yǎng)環(huán)境模擬活體內(nèi)的真實(shí)微環(huán)境,因此胃類器官在細(xì)胞成分、組織構(gòu)架及特定功能等方面與胃上皮組織高度相似,可實(shí)現(xiàn)在體外培養(yǎng)...
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分類:
類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
小鼠小腸類器官培養(yǎng)方案
2009年,荷蘭科學(xué)家Hans Clevers的團(tuán)隊(duì)成功地在體外將Lgr5+腸道干細(xì)胞培養(yǎng)成包括隱窩樣區(qū)域和絨毛樣上皮區(qū)域的三維結(jié)構(gòu),即小腸類器官,這一結(jié)構(gòu)包含所有終末分化細(xì)胞類型,能準(zhǔn)確模擬腸道上皮生理情況,這一方法的...
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分類:
類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
小鼠結(jié)腸類器官培養(yǎng)方案
一、 分離小鼠結(jié)腸隱窩 1、腹腔麻醉后采用頸椎脫臼法處死小鼠,浸泡于體積分?jǐn)?shù)為 75%的酒精中 5 min;解剖小鼠取結(jié)腸 5cm(結(jié)腸取材應(yīng)從盲腸下方 0.5 cm,直腸上方 0.5 cm 位置截?。瑢⒛c段放入 ...
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類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
人肝臟干細(xì)胞來源肝臟類器官的培養(yǎng)方法
2014 年Hans.Clever 團(tuán)隊(duì)從手術(shù)切除的原代肝組織中分離細(xì)胞并通過表面標(biāo)記EPCAM 篩選細(xì)胞,使用細(xì)胞外基質(zhì)膠Matrigel,結(jié)合細(xì)胞因子和小分子化合物的三維類器官培養(yǎng)方法成功的在體外大量擴(kuò)增了具有...
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類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
人多能性干細(xì)胞來源肝臟類器官的培養(yǎng)方法
引言: 人肝臟類器官以hESCs/iPSCs 為來源,將其誘導(dǎo)到定型內(nèi)胚層,再誘導(dǎo)肝譜系特化的階段(HS),將細(xì)胞植入細(xì)胞外基質(zhì)膠中,并且添加類器官培養(yǎng)成分Advanced DMEM/F12 、N2 、B27 、N...
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類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
人多能誘導(dǎo)干細(xì)胞來源腎臟類器官的培養(yǎng)方法
引言: 腎臟類器官的培養(yǎng)首先用高濃度的CHIR99021刺激HIPSC進(jìn)行2D培養(yǎng),促進(jìn)其向原條中胚層分化,隨后加入CHIR99021、FGF-9因子誘導(dǎo)其向間介中胚層分化;最后將細(xì)胞團(tuán)轉(zhuǎn)入Transwell小室內(nèi)...
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類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
從人ESCsiPSCs誘導(dǎo)腦類器官
過去,中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)藥物研究主要依賴于嚙齒動(dòng)物模型或細(xì)胞體外模型等傳統(tǒng)方法。由于人類和嚙齒類動(dòng)物間的物種差異,所獲得的數(shù)據(jù)難以真實(shí)地模擬神經(jīng)發(fā)育和疾病機(jī)制等。隨著干細(xì)胞技術(shù)的發(fā)展,培養(yǎng)人大腦類器官成為目...
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類器官培養(yǎng)專欄
2024-04-24
成人小腸類器官的培養(yǎng)與分化
2011年,Hans Clevers等首先報(bào)道了成人小腸類器官的構(gòu)建方法,培養(yǎng)及分化的人小腸類器官分別具有小腸上皮組織隱窩和絨毛區(qū)域細(xì)胞的特征,小腸類器官與小腸上皮組織在細(xì)胞組成和形態(tài)結(jié)構(gòu)上高度相似,...
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2024-04-24
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